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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法酯酶系列BC0840-50T/48S羧酸酯酶(CarE)活性檢測試劑盒

羧酸酯酶(CarE)活性檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
-20℃
中文名稱
羧酸酯酶(CarE)活性檢測試劑盒
有效期
6個月
單位

英文名稱
Carboxylesterase(CarE) Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號:BC0840-50T/48S

更新時間:2024-04-07

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1799

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產(chǎn)品介紹

羧酸酯酶(CarE)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號:BC0840
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一粉劑×22-8℃保存
試劑二粉劑×2-20℃保存
試劑三液體70 mL×1瓶2-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑一:臨用前取1瓶先加入1.25mL無水乙醇,震蕩使其大部分溶解,再加入8.75mL試劑三,震蕩至充分溶解用不完的試劑2-8℃保存一周。

  2. 試劑二:臨用前取1瓶試劑二中加入18mL試劑三,震蕩使其充分溶解。本試劑溶解后為淡黃色,且在常溫下不穩(wěn)定,建議根據(jù)樣本量取適當(dāng)配好的試劑二置于冰上待用,剩余試劑分裝后置于-20℃保存一周,禁止反復(fù)凍融。

產(chǎn)品說明:
哺乳動物CarE,也稱脂族酯酶(aliesterase),廣泛分布于組織和器官,屬于絲*酸水解酶家族。CarE催化含酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵的內(nèi)源性與外源性物質(zhì)水解,但不能催化水解乙酰*堿及其類似物。CarE參與脂質(zhì)運輸和代謝,并且與多種藥物、環(huán)境毒物以及致癌物的解毒和代謝有關(guān),有機(jī)磷農(nóng)藥可結(jié)合并且抑制CarE
CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固藍(lán)顯色;在450nm光吸收增加速率,計算CarE活性。


注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、超聲破碎儀,蒸餾水和無水乙醇。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項:

  1. 試劑二為-20℃儲存試劑,在常溫下不穩(wěn)定,一般常溫放置2-3小時后即可明顯發(fā)現(xiàn)液體由淺黃色變?yōu)闇\褐色

(液體變褐色視為變質(zhì),不可用)。建議試驗前根據(jù)樣本量計算所需試劑二的用量,在試劑二溶解后,留取所需用量置于冰上待用,剩余試劑可分裝后-20℃儲存。

  1. 動物組織樣本一般稀釋8倍或更大稀釋倍數(shù)后進(jìn)行操作測定。

  2. 當(dāng)吸光值大于1時,建議將樣本用蒸餾水稀釋后測量。計算公式注意乘以稀釋倍數(shù)。

  3. 建議反應(yīng)時保持37℃的環(huán)境,且逐一比色。

實驗實例:

  1. 取0.1g小鼠肝臟加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清用蒸餾水稀釋32倍后按照測定步驟操作,用玻璃比色皿測得計算ΔA空白管=A2-A1=0.202-0.140=0.062,ΔA測定管=A2-A1=0.959-0.185=0.774,按樣本質(zhì)量計算酶活得:

CarE酶活(U/g質(zhì)量)=4×(ΔA測定管-ΔA空白管)÷W×F=4×(0.774-0.062)÷0.1×32=911.36 U/g 質(zhì)量。

  1. 取0.1g小鼠腎臟加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清用蒸餾水稀釋8倍后按照測定步驟操作,用玻璃比色皿測得計算ΔA空白管=A2-A1=0.202-0.140=0.062ΔA測定管=A2-A1=0.586-0.231=0.355,按樣本質(zhì)量計算酶活得:

CarE酶活(U/g質(zhì)量)= 4×(ΔA測定管-ΔA空白管)÷W×F=4×(0.355-0.062)÷0.1×8=93.76 U/g 質(zhì)量。

  1. 取馬血清用蒸餾水稀釋8倍后按照測定步驟操作,用玻璃比色皿測得計算ΔA空白管=A2-A1=0.202-0.140=0.062ΔA測定管=A2-A1=0.621-0.130=0.491,計算酶活得:

CarE酶活(U/mL)=4×(ΔA測定管-ΔA空白管) ×F=4×(0.491-0.062)×8=13.728 U/mL 質(zhì)量。
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC2020/BC2025 乙酰*堿酯酶(AchE)活性檢測試劑盒
BC2130/BC2135 組織及血液酸性磷酸酶(ACP)活性檢測試劑盒

羧酸酯酶(CarE)活性檢測試劑盒 羧酸酯酶(CarE)活性檢測試劑盒


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