Elisa檢測試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被豬藍耳病抗體（PRRS-Ab）捕獲抗原的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。

　　

　　在應用Elisa檢測試劑盒時，首先要清楚下面內(nèi)容：我們測定Elisa試劑盒到底是檢測抗體還是抗原？對這兩種抗體，抗原分別作了測試，大家可以根據(jù)我們給出的結(jié)果做個對別，從而分辨出Elisa試劑盒到底是檢測抗體還是抗原？

　　

　　1、檢測抗原：

　　

　　常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法，其次是競爭法。但競爭法在具體實驗中有些困難，特別是檢測微生物的抗原，因為需要標記抗原，這對于某些抗原是很難做到的，甚至是不可能的。另外在競爭法中，酶標記的抗原與標本直接混合在一起，許多標本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì)，可影響ELISA的結(jié)果。

　　

　　2、檢測抗體：

　　

　　檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法，這個方法常用于檢測特異性IgG、IgA和IgM。這個方法是捕獲所需要檢測的一個種類的抗體，接下來是檢測捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測IgG時比較簡單，但不適用于檢測其他種類的抗體，因為血清中如果有特異IgG存在將與IgM或IgA等競爭結(jié)合抗原。

　　

　　Elisa檢測試劑盒操作注意事項：

　　

　　1、試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

　　

　　2、實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

　　

　　3、預處理后的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。

　　

　　4、所有液體組分使用前充分搖勻。

　　

　　5、Elisa檢測試劑盒需要嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。